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原位杂交技术.ppt
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技 术 2012-12-06 原位杂交技术 一 二 原位杂交技术的历史发展 原位杂交技术的原理及分类 原位杂交技术的一般过程 原位杂交技术的应用 三 四 一、原位杂交技术的历史发展 原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是分子生物学、 组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪 60年代。1969年美国耶鲁大学的Gall等首先用爪蟾核糖体基因 探针与其卵母细胞杂交,将该基因进行定位,与此同时 Buongiorno—Nardelli和Am...
- 上传者:To**e, 2024-04-23 07:08:27 文档 学习
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普通PCR、原位PCR、反向PCR和反转录PCR的基本原理和操作步骤.doc
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普通 PCR、原位 PCR、反向 PCR 和反转录 PCR 的 基本原理和操作步骤 普通 PCR 1 概述 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称 PCR,是一种分子生物学技术, 用于放大特定的 DNA 片段。可看作生物体外的特殊 DNA 复制。DNA 聚合酶(DNA polymerase I)最早于 1955 年发现,而较具有实验价值及实用性的 Klenow fragment of E. Coli 则是于 70 年代的初期由 Dr. H. Klenow 所发现,但 ...
- 上传者:Ja**ck 2024-04-16 21:52:06 文档 学习
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原位杂交和RNA原位杂交.docx
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原位杂交的基本原理 原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示 ... 3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。 RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸...
- 上传者:越过**禁线 2024-03-16 04:48:07 文档 学习
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斑点杂交.doc
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斑点杂交 一、基本原理 具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。 二、器材 杂交炉,PCR仪,Bio-Rad紫外分光光度仪,镊子等。 三、试剂 1.尼龙膜,带阳性电荷,Roche公司产品。 2.Herring sperm DNA 3.甲酰胺 4. Denhardt 5. Blocking reagent 6.Anti- ...
- 上传者:软甜**软甜 2024-03-12 17:40:39 文档 学习
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17-Northern杂交与斑点杂交.ppt
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第17讲 核酸杂交技术 -------Northern杂交与斑点杂交 温故知新 我们一起回顾上节课所学的Southern杂交: 一、DNA的变性 二、DNA的复性 三、核酸分子杂交技术 四、Southern杂交的原理和主要步骤 基本内容 一、Northern杂交的由来 二、Northern杂交的用途 三、Northern杂交的基本流程 四、Northern杂交的优点和缺点 五、Northern杂交、Southern杂交和Western杂 交的区别 六、斑点印迹杂交的原理 七、斑点印迹杂交的 ...
- 上传者:浅时**uI 2024-02-12 11:24:19 文档 学习
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原位杂交protocol.pdf
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原位所需试剂用dH2O配置,溶液高压灭菌40min即可。材料固定材料放入固定液中,抽真空1hr至材料完全浸末到固定中,更换新的固定液,室温放置3~6hr。Fixative:4 paraformaldehyde, 0.25 glutaraldehyde (EM grade), 2.5ml 10XBuffer, 12.5mldistilled water, pH 7.2~7.4 Check pH10 paraformaldehyde:10 grams paraformaldhyde in ~70ml di ...
- 上传者:Su**℡念 2024-02-11 13:12:19 文档 学习
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Inverse-PCR.doc
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... 区而不是分开引物的核心区。这种反向PCR方法可用于扩增本来就在核心区旁边的序列,还可应用于制备未知序列探针或测定边侧区域本身的上、下游序列。 引言 通常测定一个与已知序列相邻的DNA序列是必要的,例如位于编码...
- 上传者:co**le 2024-02-04 01:20:44 文档 学习
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realtime-PCR原理及应用.pdf
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实时荧光定量PCR技术的原理及应用 (Real time Quantitative PCR) 中科大生命学院仪器实验中心 梁长流 2007-9-17 提 纲: 实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量PCR的方法介绍 实时荧光定量PCR在医学和科研中的应用 实时荧光定量PCR定义: 在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧 光信号累积实现了实时监测整个PCR进程, 对起始模板进行定量分析的方法。 与普通PCR的区别 普通PCR技术: 在PCR结束后对终点产物进行定量分析。 实时定量PCR技术: 实时 ...
- 上传者:Ru**dy 2024-01-31 14:52:12 文档 学习
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核酸分子杂交.ppt
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核酸分子杂交技术 基因工程研究所 第一节 核酸分子杂交的基本原理 一. 核酸的变性与复性 二. 核酸分子杂交的基本原理 第二节 核酸探针 一. 常见的核酸探针 二. 核酸探针的标记 第三节 核酸分子杂交相关技术 一. 传统的核酸分子杂交技术 二. 原位杂交 第一节 核酸分子杂交的基本原理 一、核酸的变性与复性 二、核酸杂交的基本原理 一、核酸的变性与复性 (一)变性 当有酸、碱、热及某些变性 ...
- 上传者:何必**太多 2024-01-17 20:36:58 文档 学习
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【评测】TaqMan️探针和IDT PrimeTime️ 双淬灭探针的对比
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和miRNA、mRNA及InRNA的原位杂交探针。 IDT目前有ZEN™️型和TAO™️型两......
- 上传者:北仑**de 2023-07-18 01:50:48 文档 学习
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